流行病学 | 2015—2019年湖南省5个原种猪场主要繁殖障碍性疫病监测

摘要：为了解湖南省原种猪场主要繁殖障碍性疾病的流行情况及免疫抗体水平，2015—2019年对5个原种猪场，采集血清及对应扁桃体样品各1000份进行主要繁殖障碍性疾病检测，其中对扁桃体样品进行猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）、伪狂犬病病毒（PRV）、圆环病毒2型（PCV2）、猪细小病毒（PPV）病原检测，对血清样品进行CSFV、PRRSV、PRV-gB免疫抗体检测。结果显示：CSFV、PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2和PPV病原阳性率分别为0、2.1%、1.3%、9.5%、22.1%、28.9%；部分场PRV感染抗体（gE）反复出现转阳，多数猪场PCV2和PPV感染较严重；CSFV、PRRSV、PRV-gB免疫抗体合格率分别为96.9%、99.7%、98.7%，均超过了国家规定的70%的最低标准。结果表明，这5个原种猪场的CSFV、PRRSV、PRV抗体保护水平良好，且猪瘟基本达到了免疫无疫状态，但部分原种猪场仍存在不同程度的PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2、PPV感染，其中PCV2与PPV感染较为严重，需通过免疫、监测、生物安全控制等综合措施，加强控制与净化。

繁殖障碍性疫病是以母猪流产，产死胎、弱胎、木乃伊胎，以及不孕不育为主要特征的一类疫病，常见的有猪瘟（CSF）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）、猪伪狂犬病（PR）、猪圆环病毒病（PCVD）、猪细小病毒病（PPI）等。这几种病的病原临床多表现为混合感染，也可通过种猪垂直传播至下一代，造成更大范围的感染，给养猪业造成巨大经济损失。自非洲猪瘟在我国暴发以来，种猪已成为当前养猪业的稀缺资源，如何防控非洲猪瘟和主要繁殖障碍性疫病，提高母猪健康水平和生产性能，是种猪场急需解决的问题。当前，湖南省共有原种猪场17个，一级扩繁场131个，其他类型种猪场300余个。为了解湖南省原种猪场主要繁殖障碍性疫病流行情况，结合我国原种猪场的监测要求，自2015年开始，对省内5个原种场进行了CSF、PRRS、PR、PCVD、PPI等主要繁殖障碍性疫病的病原和抗体监测，以期为全省种猪主要繁殖障碍性疫病防控及净化策略制定提供参考。

材料与方法

材料

待检样品。根据农业农村部畜牧兽医局关于《种畜禽场主要动物疫病监测实施方案》要求，并结合湖南省原种猪场自身情况，自2015起，在湖南省原种猪场，选择存栏量在5000头以上的5个大型原种场（A、B、C、D、E），每年6—8月进行一次采样检测。样品来源原则上每个原种猪场不少于3栋猪舍的猪只，其中种公猪5头、经产母猪25头（1~2胎5头、3~4胎10头、5~6胎10头）、后备母猪10头（40~60kg 5头、90~110kg 5头）。每个原种猪场共计采集40份猪血清及相对应的40份扁桃体样本。截至2019年，共在5个原种猪场，采集猪血清及扁桃体样品各1000份，-20℃以下保存待检。

病原学检测试剂。猪瘟病毒（CSFV）通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒（50头份），猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）实时荧光PCR检测试剂盒（50头份），猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）通用型RT-PCR检测试剂盒（50头份），PRRSV Nsp1594-1680变异株RT-PCR检测试剂盒（50头份），猪细小病毒（PPV）实时荧光PCR检测试剂盒（50头份）。

主要仪器设备。核酸提取仪、PCR仪、荧光PCR仪、组织研磨仪、酶标仪、离心机等。

方法

病原学检测。将采集的扁桃体样本捣碎，提取病毒核酸。采用实时荧光定量方法，检测组织样本中CSFV、PCV2、PPV核酸。体系配置、反应条件及判定标准，参照试剂盒说明书进行。对病毒核酸先使用通用型RT-PCR扩增PRRSV，对阳性样品再用RT-PCR进行HP-PRRSV（变异株）扩增，根据结果判定感染类型；在用PRV gE基因缺失疫苗免疫的猪场，检测PRV-gE抗体，若呈阳性，则判定为PRV野毒感染，即病原阳性。试验操作严格按照试剂盒说明书进行。

血清学检测。所有采集的血清样本，利用ELISA方法检测血清中CSFV、PRRSV、PRV-gB抗体，参照各试剂盒说明书进行操作及判定标准。本调查未进行PPV、PCV2免疫抗体检测。

结果与分析

病原学监测

不同年份感染情况。2015—2019年，5个原种猪场均未检测到CSFV核酸阳性，部分或全部猪场检测到PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2、PPV核酸阳性（表1），个体阳性率分别为2.1%、1.3%、9.5%、22.1%、28.9%（表2）。不同年份的病原感染情况存在一定差异，其中PRRSV与HP-PRRSV核酸阳性率整体呈下降趋势，而PRV、PCV2、PPV整体呈波动状上升趋势，且PCV2和PPV污染面广，感染较严重。

不同病原感染情况。由表2可见：5个种猪场连续5年未检测到CSFV核酸阳性，说明CSF基本达到了免疫无疫状况。PRRSV和HP-PRRSV感染反复出现，2017年和2019年核酸检测均为阴性，其他年份均检测到阳性。PRV感染率呈波动状变化，2015、2016和2018年核酸阳性率在2.5%以下，而2017和2019年核酸阳性率陡增至20%以上。PCV2和PPV核酸阳性率居高不下，在14.5%~41.0%之间波动。

不同猪场感染情况。5个原种猪场连续5年的病原学检测结果（表3）显示：A场PRRSV核酸和PRV-gE抗体连续5年保持阴性，HP-PRRSV偶有检出，PCV2和PPV阳性率在0~32.5%之间波动；B场病原阳性率整体较低，但个别年份高发，如2019年PRV-gE阳性达到50.0%，PCV2阳性率达到52.5%，2016年PPV阳性率高达82.5%；C场PRRSV阳性率较低，但PRV、PCV2、PPV核酸阳性率普遍较高；D场PRRSV连续5年检测为阴性，PRV-gE在2017和2019年突然转阳，阳性率在50%以上，PCV2和PPV阳性率高低起伏，2019年PPV阳性率高达95.0%；E场PRRSV和PRV连续5年检测均为阴性，而PCV2和PPV阳性率在10.0%~57.5%之间波动。

血清学监测

对所有采集的1000份血清样品进行了CSFV、PRRSV、PRV-gB免疫抗体检测。结果（表4）显示，CSFV、PRRSV、PRV-gB抗体合格率分别为96.9%、99.7%、98.7%，均达到农业农村部要求的70%以上的标准，表明各猪场3种病原的抗体保护水平良好。

     讨论

CSF

近年来，我国实施CSF强制免疫等一系列综合防控措施，使得该病得到有效控制，CSF净化工作正逐步推进。2011—2018年，王琴等开展CSF病原学监测，发现健康猪群带毒率从9.26%下降到0.70%，全国发病率和死亡率一直处于下降状态，表明我国CSFV C株疫苗对我国现有的流行毒株提供了有效保护。本次监测发现，2015—2019年湖南省5个种猪场CSF病原学检测均为阴性，且每年免疫抗体水平均在96.0%以上，基本达到了免疫无疫状态，可适时开展CSFV净化根除。

PRRS

我国目前对PRRS的防控主要采取疫苗免疫。但由于PRRSV变异快，不同地区流行毒株存在一定差异，防控效果不理想，病毒感染长期存在。宋玉慧对2013—2016年河南省规模猪场采集样本进行病原学调查，发现PRRSV阳性率为20.6%；王倩等对2015—2018年安徽省定点猪场主要疫病病原进行检测，发现PRRSV平均阳性率为26.9%。本监测从2015年开始对湖南省5个原种猪场开展连续5年的病原检测，结果发现PRRSV与HP-PRRSV阳性率分别为2.1%和1.3%，远低于前面二者的报道，表明湖南省种猪场通过免疫监测等综合控制措施，使PRRS得到了有效控制。但本监测也发现，不同年份均有猪场出现PRRS疫情反弹现象，需引起重视。吴佳俊等对我国种猪场主要垂直传播疫病进行动态监测发现，2015年PRRS疫情出现了反弹，场阳性率与个体阳性率出现了大幅上升。

PR

PR是我国目前猪群疫病优先净化的病种之一，且已取得了一定的防控成效。本次监测发现，湖南省原种猪场中，PRV-gE抗体转阳与野毒感染情况仍然存在。林琳等对福建省不同规模猪场PRV野毒感染调查发现，种猪场PRV-gE个体阳性率为30.2%；占松鹤等对安徽省规模化种猪场开展PRV血清学调查，发现PRV-gE个体阳性率为18.9%；朱小甫等对2013—2017年陕西省PRV的分子流行病学调查显示，发病猪群中PRV野毒感染率达到了72.3%。本监测发现的PRV-gE个体阳性率为9.5%，远低于上述报道，但仍有3个种猪场反复出现gE抗体阳性，部分场阳性率高达50%以上，因此需要加强生物安全控制，防止野毒感染。

PCVD

PCVD已经成为危害我国养猪业的主要疫病之一。其病原PCV2污染面广、感染率高，引起的危害最大。近年来，PCV3在我国猪群中也开始出现，因而增加了该类疫病的防控难度，已引起了学者的广泛关注。何长生等对安徽省部分猪场健康猪群猪圆环病毒感染情况进行调查发现，PCV2场阳性率与个体阳性率分别为91.7%和67.4%；蒋新华等对2013—2017年江西省10个地区进行PCV2检测，发现个体阳性率为56.4%。本次监测发现，湖南省5个种猪场普遍存在PCV2感染，个体阳性率为22.1%，与其他地区相比虽然个体阳性率略低，但感染也很普遍，应在生产过程中重视该病防控。

PPI

引起PPI的病原PPV主要感染初产母猪，引起流产、产死胎等繁殖障碍，但母猪本身无明显临诊症状，容易被忽视。目前国内猪场PPV感染比较严重，污染面广。孙泉云等对2015—2017年上海市规模猪场开展PPV病原监测，发现总阳性率为8.7%；吴佳俊等对我国种猪场开展动态监测发现，PPV场阳性率与个体阳性率分别为95.6%和33.6%。本监测发现，湖南省种猪场PPV感染普遍，个体阳性率为28.9%，与全国检测数据基本持平，但高于上海市规模猪场数据，表明种猪场的PPV感染较严重，需加强控制与净化。

对湖南省5个大型原种猪场连续5年的监测表明：各种猪场的CSF得到了有效控制，基本达到了免疫净化状态。而部分原种猪场仍存在不同程度的PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2、PPV感染，其中PRRSV、HP-PRRSV、PRV感染反复出现，PCV2与PPV感染率居高不下，病毒污染面较广。因此，需通过免疫、监测、生物安全控制等综合措施，加强这些疫病的控制与净化。

　　（责任编辑：朱迪国）

转自：中国动物检疫 ，作者陈峰 等